Привет, энтузиасты микроскопии! Как поставщик вершины - ступенькаТринокулярный световой микроскопЯ очень рад, чтобы поделиться некоторыми взглядами на то, как максимально использовать различные режимы освещения на этих удивительных устройствах.
Понимание оснований освещения в тринокулярном световом микроскопе
Прежде чем мы погрузимся в конкретные режимы освещения, давайте быстро рассмотрим, почему освещение настолько важно. В тринокулярном световом микроскопе правильное освещение - это то, что позволяет нам четко увидеть крошечные детали образцов. Это все равно, что осветить центр внимания на сцене, чтобы раскрыть всех актеров и их движений.
Тринокулярный дизайн дает нам дополнительный окуляр, который часто используется для прикрепления камеры. Это отлично подходит для захвата изображений или записи видео о том, что мы видим. Но без правильного освещения эти изображения и видео не получатся хорошо.
Ярко -прозрачный освещение
Brightfield Ollumination является наиболее распространенным и простым режимом. Это как включать обычную лампочку в комнате. В этом режиме образец помещается на сцену, и свет проходит непосредственно через него снизу. Свет, который проходит через образец, попадает в объектив, а затем достигает наших глаз или камеры.
Этот режим идеально подходит для образцов, которые окрашены или имеют естественный контраст. Например, если вы смотрите на слайд окрашенных бактерий, Brightfield Olmination сделает бактерии выделяться на фоне. Чтобы использовать освещение Brightfield, просто включите источник света, обычно расположенный у основания микроскопа, и при необходимости отрегулируйте интенсивность. Вы также можете использовать конденсатор, чтобы сосредоточить свет на образце.
Один веща, которую нужно иметь в виду, это то, что если ваш образец слишком прозрачен или имеет низкий контраст, Brightfield Ollumination может показать вам не так много. В таких случаях вам нужно попробовать другие режимы освещения.
Вновь освещение
Darkfield Owrumination немного интереснее. Вместо того, чтобы светить свет прямо через образец, он освещает образец с боковых сторон. Это создает темный фон, и образец выглядит ярким против него. Это как смотреть на звезды в ночном небе.
Чтобы настроить освещение Darkfield, вам понадобится конденсатор Darkfield. Этот конденсатор блокирует центральные светильники и позволяет только периферийным лучам достигать образца. Когда эти периферические лучи попадают в образец, они разбросаны, и этот рассеянный свет - это то, что мы видим.
Освещение Darkfield отлично подходит для наблюдения в прямом эфире, неокрашенных образцах, таких как простейшие или небольшие организмы в образцах воды. Он может раскрыть детали, которые можно пропустить при освещении в Брайтфилде, таких как движение ресничек или жгутиков.
Фазовое контрастное освещение
Фазовое освещение - это игра - изменение, когда дело доходит до наблюдения прозрачных образцов. Многие биологические образцы, такие как живые клетки, в основном прозрачны, и трудно увидеть их внутренние структуры с освещением Яркогофилда.
Фазовый контрастный работает путем преобразования различий в показателе преломления образца в различия в яркости. Проще говоря, это делает внутренние структуры образца более заметными. Для использования фазового контрастного освещения вам понадобится целевая объектив -объектива фазового контраста и соответствующее кольцо конденсатора.
Цель Fash Contrast имеет специальную фазовую пластину, которая смещает фазу света, проходящего через образец. Когда этот сдвинутый свет сочетается с неподвижным светом, он создает контраст. Этот режим широко используется в исследованиях клеточной биологии для изучения деления клеток, движения клеток и других клеточных процессов.
Дифференциальное интерференционное контрастное освещение (DIC) освещение
Освещение DIC, также известное как контраст помеха номарски, является еще одним передовым режимом освещения. Он обеспечивает трех - размерный вид образца, что делает его более похожим на реального объекта жизни.
DIC работает, разделяя луч света на два пути. Один путь проходит через образец, а другой проходит через эталонную область. Когда два луча рекомбинируют, они мешают друг другу, создавая контраст на основе различий в длине оптического пути.
Этот режим отлично подходит для наблюдения за поверхностными характеристиками и внутренними структурами образцов в высоком разрешении. Он часто используется в материаловедении для изучения микроструктуры металлов и в биологических исследованиях для наблюдения за тонкими деталями клеток и тканей.
Флуоресцентное освещение
Освещение флуоресценции - это мощный метод, используемый для визуализации определенных молекул или структур в образце. Он работает с помощью особого источника света, обычно ртуть или ксеноновую лампу, для возбуждения флуоресцентных красителей или белков в образце.
Когда эти флуоресцентные молекулы возбуждаются, они излучают свет на другую длину волны, которая затем обнаруживается микроскопом. Чтобы использовать флуоресцентное освещение, вам понадобится набор фильтров флуоресценции, который соответствует длин волн возбуждения и излучения флуоресцентного красителя.
Освещение флуоресценции широко используется в молекулярной биологии, иммунологии и нейробиологии. Например, его можно использовать для маркировки специфических белков в клетках или для отслеживания движения молекул в живом организме.
Выбор правильного режима освещения
Теперь, когда вы знаете о различных режимах освещения, как вы выбираете правильный? Ну, это зависит от вашего образца и того, что вы хотите наблюдать.
Если вы работаете с окрашенными образцами, Brightfield Olmination обычно является хорошей отправной точкой. Для живых, неокрашенных образцов, Darkfield или фазового контраста могут быть лучше. Если вам нужно высокое разрешение, три - размерные изображения, DIC - отличный вариант. И если вы заинтересованы в визуализации определенных молекул, флуоресцентное освещение - это путь.
Использование камеры с различными режимами освещения
Если вы используетеТринокулярный микроскоп 2000xи прикрепили камеру, используяАдаптер камеры тринокулярного микроскопа, вы захотите убедиться, что настройки камеры настраивались для каждого режима освещения.
Например, при освещении в Брайтфилде вам может потребоваться отрегулировать баланс белого и время экспозиции, чтобы получить четкое изображение. При освещении флуоресценции вам нужно настроить камеру, чтобы захватить конкретную длину волны излучения флуоресцентного красителя.
Обслуживание и устранение неполадок
Чтобы убедиться, что ваши режимы освещения работают должным образом, необходимо регулярное обслуживание. Держите источник света в чистоте и замените луковицы, когда они начнут туснуть. Проверьте конденсаторы, фильтры и фазовые пластины на предмет любого повреждения или грязи.
Если у вас есть проблемы с освещением, например, неравномерное освещение или низкий контраст, сначала проверьте выравнивание конденсатора и объективного объектива. Убедитесь, что источник света правильно отрегулирован и что фильтры находятся в правильном положении.
Заключение
В заключение, различные режимы освещения на тринокулярном световом микроскопе дают широкий спектр возможностей для наблюдения за образцами. Являетесь ли вы студентом, исследователем или любителем, понимание того, как использовать эти режимы, может вывести ваш опыт микроскопии на новый уровень.
Если вы заинтересованы в покупке тринокулярного светового микроскопа или вам нужно больше информации о наших продуктах, не стесняйтесь обратиться. Мы здесь, чтобы помочь вам найти идеальный микроскоп для ваших потребностей и предоставить вам всю необходимую поддержку, чтобы максимально использовать его.
Ссылки
- Мерфи, Д.Б. (2001). Основы световой микроскопии и электронных визуализации. Уайли - Лисс.
- Inoué, S. & Spring, KR (1997). Видео микроскопия: основы. Plenum Press.
